Можно добавить, что разработанные в исследовании интратела представляют собой не «нанотела», а одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv), сконструированные на основе обычных моноклональных антител мыши и человека. Эти интратела не «проникают» в клетку извне, а синтезируются непосредственно внутри неё после доставки генетической конструкции (например, с помощью плазмиды).

Главным открытием работы стало не просто изменение заряда, а выявление закономерности: чтобы достичь растворимости выше 80%, суммарный заряд молекулы scFv при физиологическом pH должен быть меньше –15. Авторы также разработали новые междоменные линкеры, которые несут отрицательный заряд и таким образом значительно повышают растворимость интрател по сравнению с классическим линкером.

Вместо простого введения точечных мутаций исследователи применили метод «обратного фолдинга» с помощью нейросети ProteinMPNN, который позволил перепроектировать до 30% аминокислотных позиций, сохранив при этом структуру антиген-связывающих петель.

Особую ценность работе придаёт то, что полученные интратела сохраняют не только аффинность, но и высокую специфичность, различая, например, мутантные формы белка SOD1 (связанные с боковым амиотрофическим склерозом) от нормального дикого типа. В итоге авторы не только создали 672 новых предсказанных интратела против клинически значимых мишеней (включая тау-белок, α-синуклеин, p53 и полиглутаминовые тракты), но и сделали все последовательности общедоступными, заложив основу для открытой платформы внутриклеточных взаимодействий.

Вообще, модификация уже существующих терапевтических белков таит много нового, особенно когда речь идёт не просто о мутациях, а о кардинальном перепроектировании физико-химических свойств молекулы — как в случае с изменением суммарного заряда, что превращает нерабочий фрагмент антитела в высокорастворимый и стабильный инструмент.