✅ ترتیب صحیح (۱ تا ۵):

۱. (ب) طراحی gRNA با توالی راهنمای مکمل ناحیه هدف
۲. (ت) تشکیل کمپلکس عملکردی gRNA-Cas9
۳. (پ) جست‌وجوی ژنوم، شناسایی PAM و بررسی تطابق توالی هدف با gRNA
۴. (ث) ایجاد شکست دو‌رشته‌ای (DSB) در DNA
۵. (الف) ترمیم شکست از طریق NHEJ یا HDR و ایجاد تغییر در توالی هدف


🧠 نکته: PAM خودش توسط gRNA شناسایی نمی‌شود؛ Cas9 برای شناسایی و اتصال مؤثر به DNA هدف به وجود یک توالی PAM مناسب نیاز دارد.

✍🏻 فاطمه زهرا فیضی

📥 منابع:
Nature blog doi doi

📍Instagram | Linkedin | Support

─━⊱🧬 آکادمی ژنتیک ایران
─━⊱🧬 @ir_Genetics_academy