Zmall Pharma

Адмему надо дотянуть до пятницы, хотя бы на шаверме и лит-энерджи((((999

#зоопарк_одобряет

ДНК-аптамеры против рака: найден способ доставить лекарство точно в глиобластому, не задев здоровые ткани

Новости с фронта борьбы с глиобластомой, очень и очень агрессивной опухолью мозга. Как мы уже не раз писали, основная проблема, которая не дает эффективно применять химиотерапию - прицельная доставка лекарства (мозг есть мозг, ГЭБ есть ГЭБ...)

Ученые из Института высшей нервной деятельности и нейрофизиологии #РАН (Москва) сравнили два ДНК-аптамера и доказали, что их усовершенствованная версия Gol1 не только точно находит опухолевые клетки в мозге, но и запускает в них программу самоуничтожения.

Аптамеры в данном случае - это специальные короткие молекулы ДНК, которые способны связываться с белками-мишенями с точностью, сравнимой с антителами. Исходный аптамер U2 был отобран против клеток глиобластомы с высокой экспрессией мутантного рецептора EGFRvIII. Его модифицированная версия Gol1меньше (короче) и куда устойчивее.
Gol1 показал высокую EGFRvIII. В опытах на крысах с привитой глиобластомой FAM-меченый Gol1 накапливался строго в опухоли с максимальным контрастом в инвазивной зоне (край, где клетки врастают в здоровую ткань), и полностью отсутствовал в здоровой ткани.

Прелесть же тут еще и в том, что аптамеры, в отличие от антител, не иммуногенны, малы (легче проникают в ткань) и куда дешевле в биотех производстве. Ученые полагают, что Gol1 в перспективе вполне может стать универсальной платформой для тераностики глиобластомы. Ждем новых препаратов и клиниспытаний, конечно же.

Статья вышла в Pharmaceutics (IF = 5.5)

#обозревая_происходящее

Официально от МИД России: если вы сирота и социофоб приехали на стратсессию по развитию научно-образовательной политики в Дубай (то есть еще не фигурант уголовного дела в России и вас выпустили) и вас еще не накрыло наглухо иранской ракетой на радость вашим подчиненным, пишите в консульство РФ и готовьтесь жить в спартанских условиях. Можно в какой-нибудь рязанской или пензенской вузовской общаге. Лучше бы пожизненно, с сортиром на этаже.

Наш Зоопарк иногда злой, но мы и не обещали быть добрыми, да. Слишком хорошо помним роскошные выезды некоторых персонажей в Дубай в разгар СВО "в командировки". С важным государственным видом и осознанием собственной значимости в каждом шаге.

Нет, мы не против того, чтобы люди ездили в отпуск куда угодно на свои кровные - хоть в Сочи, хоть в Дубай, хоть Антананариву, это ваше 100% законное право. Но когда из каждого утюга сурово велят затянуть пояса, а кто-то за счет вверенного (и при этом нищего) вуза в 2022 или там 2023 г. валит в ОАЭ щупать эскортниц и тариться в Prada за госсчет под видом "развития российской научно-образовательной повестки", у нас натурально встает шерсть на загривке. Что поделать, как есть

В этот день, 2 марта (по старому стилю) 1917г, был убит Император Николай II.

Спите спокойно, Государь. Мы вас помним и любим.

Парочка релокантов стоит в аэропорту Белграда на пограничном контроле. Офицер контроля спрашивает:
— То есть, ваша история такая: когда в феврале 22 началось на Украине, вы вместе уехали в Армению. Когда там начались события в Карабахе - вы уехали в Израиль. Когда началось в Израиле - мы умчались в Дубаи. А сейчас вы хотите попасть в Сербию?
— Да, все так.
— Вам отказано во въезде.
— Но почему?
— По правилам мы не обязаны раскрывать причину отказа. Но вам скажу. Нам кажется, вы приносите несчастья. Но мы можем вам вместо этого купить билеты в Албанию.

Поскольку на этой неделе на гистологии мы смотрели железы, то сегодняшняя статья про железы. Об этой работе мне рассказали мои олимпиадники пару лет назад.

#статья

В 2020 году группа нидерландских учёных совершила удивительное открытие — они обнаружили ранее неизвестную пару слюнных желёз, которую назвали «трубными слюнными железами» (tubarial salivary glands). Железы расположены в глубине носоглотки — в районе так называемой трубной складки (складки слизистой оболочки, окружающей глоточное отверстие слуховой трубы). Отсюда и их название. Они находятся за носоглоткой, вблизи основания черепа.
Открытие произошло случайно. Исследователи проводили ПЭТ‑КТ (позитронно‑эмиссионную и компьютерную томографию) у пациентов с раком простаты. На снимках учёные заметили симметричную структуру в носоглотке — она вела себя точно так же, как известные слюнные железы.
Чтобы подтвердить находку, команда изучила ткани умерших людей с помощью гистологического анализа. Результаты подтвердили: это действительно железистая ткань со всеми характерными признаками слюнной железы — протоками и клетками, вырабатывающими секрет.
Почему их не нашли раньше? Есть несколько причин.
Глубокое расположение. Железы скрыты в труднодоступном месте, их сложно рассмотреть при обычном анатомическом вскрытии.
Малый размер. По сравнению с крупными слюнными железами (околоушными, подъязычными и поднижнечелюстными) трубные железы невелики.
Отсутствие чётких границ. Они не заключены в плотную капсулу, а плавно переходят в окружающую ткань.
Хотя функции трубных желёз ещё изучаются, учёные предполагают, что они: увлажняют и защищают носоглотку и область вокруг слуховой трубы; помогают предотвратить пересыхание тканей в этой критически важной зоне; могут играть роль в иммунной защите верхних дыхательных путей.
Практическое значение открытия – это не просто академический интерес. Понимание расположения и функции желёз важно для лучевой терапии при лечении опухолей головы и шеи. Если во время облучения случайно повредить трубные железы, у пациента может развиться сильная сухость во рту и носоглотке, что резко снижает качество жизни (ксеростомия). Теперь врачи могут точнее планировать лечение, защищая эту новую структуру.
Открытие трубных слюнных желёз доказывает, что человеческое тело ещё хранит тайны. Даже в XXI веке, когда, казалось бы, анатомия изучена вдоль и поперёк, наука способна удивлять нас новыми деталями устройства нашего организма.

Сортировка клеток для нокаутов

1️⃣Начать необходимо с оптимизации пробоподготовки, чтобы мы были уверены, что редактируемые клетки экспрессируют мишень и специфично и селективно окрашиваются.

2️⃣Независимо от того, вносим ли мы гиды и Cas трансфекций или лентивирусной трансдукцией, искомых клеток довольно мало и перед отбором нужных стоит обогатить популяцию трансфицированными или трансдуцированными клетки антибиотиком или сортировкой в зависимости от маркера селекции в генетических конструкциях.

3️⃣А когда клетки подрастут, уже можно отсортировать популяцию, в которой нет сигнала, ориентируясь на положительный (от окрашенной популяции дикого типа) и отрицательный (не окрашенному антителами к мишени образцу) контролям.

❗️В случае сортировки негативной популяции важно подобрать вольтаж так, чтобы поместить ее полностью в положительную область. Во-первых, на приборах BD просто не будет сортировать популяция, содержащая клетки с сигналом ниже нуля, а во-вторых, для детекции редких событий важно, чтобы сигнал от них превышал электронный шум.

#FAQs_про_FACS
#flowwithglow

Планируем покрасить клетки для цитометрии (1): контроли

Меня часто спрашивают недавно спросили, можно ли отсортировать клетки с нокаутом гена поверхностного белка, окрашивая мишень антителами. Это сложнее, чем отсортировать клетки с повышенной экспрессией, потому что требует аккуратной пробоподготовки.

Вообще любой эксперимент по цитометрии - да и с помощью других методов - включает в себя постановку задачи с выбором модели и критериями оценки результата, пробоподготовку и оптимизацию протокола измерения. Каждый этап требует оптимизации и контролей, особенно если необходимо достоверно убедиться в отсутствии экспрессии. Предположим, что мы уже выбрали клетки и антитела и хотим отработать протокол.

1️⃣Контроли для пробоподготовки
Мы можем красить клетки первичными мечеными антителами, что встречается чаще, или немечеными первичными + мечеными вторичными.

🧪 Чтобы убедиться, что сигнал пропорционален количеству мишени, необходимо оптимизировать концентрацию антител, для чего надо их оттитровать и определить индекс окрашивания (stain index). Об этом подготовительном эксперименте напишу в отдельном посте.

🧪 Для того, чтобы определить фон и выявить неспецифику, - особенно для поставленной выше задачи - имеет смысл поставить технический негативный контроль.

🔸Иногда в случае первичных меченых антител используют изотип-контроли (антитела того же изотипа и с тем же флуорохромом, которые не связывают никакие мишени в клетках), но я бы предпочла для отрицательного контроля покрасить нужным антителом клетки, не экспрессирующие мишень. В качестве примера с маленькой натяжкой могу привести окраску антителом к CD8 CD4 T-клеток. Такой контроль характеризует не только антитело, но и то, насколько оптимизирован протокол пробоподготовки.

🔸В случае непрямого окрашивания необходимо оптимизировать оба антитела. Сначала оптимизируем вторичное: окрашиваем только вторичным антителом (технический отрицательный контроль) и с первичным антителом. Выбираем концентрацию, при которой есть сигнал при окрашивании вместе с первичным антителом, но нет сигнала при окрашивании только вторичным, и уже потом титруем первичное.

2️⃣Контроли для измерения и оценки сигнала
Чтобы определить положительную популяцию, надо поставить гейт относительно отрицательной популяции, для чего используется FMO (fluorescence minus one) контроль - тот же образец, окрашенный всеми антителами, кроме интересующего. В случае непрямого окрашивания можно окрашивать негативный контроль только вторичным антителом.
Использовать для гейтирования контроли из пункта 1 (изотип и окрашенные клетки, не экспрессирующие мишень) - с моей точки зрения, неудачная идея, хотя говорили, что так делают.

#FAQs_про_FACS
#flowwithglow

Меня тут подсадили на программу "Мужское и женское" - в чистом виде и с реактами. Мамадорогая, нахуй так жить.
У меня аж очко сжимается от количества кринжа, которое там вываливается на зрителя. Особенно запомнились АЖ 4 СЕРИИ, где пытались определить отцовство у 11 детей.
Врезки, где показывают условия жизни героев программы, я иначе как балабановщиной назвать не могу - самая густая и смачная чернуха, которую пускают на тв. (за исключением "Сети-НН" - ван лав)

Две недели назад в Иране сожгли статую Баала. Сегодня США и Израиль немедленно атаковали Иран

Думайте

Бладсикер. Подписаться

ОТ ВСЕЙ ДУШИ

желаю Америке и Израилю самого сокрушительного поражения. Такого, после которого никогда не захочется снова на кого-то нападать - ломая жизни целым странам.

https://youtu.be/98qiQJ8maCU

Один из моих подписчиков оценит этот ролик, который мне подарили алгоритмы ютуба.

Слово для обозначения загадочных смертей олигархов: НОВИОПОПТОЗ

#фейспалм

Камрад @baltictea откопал видео Аси Казанцевой (признанной иноагентом, хотя правильнее было бы признать ее просто дурой, можно без реестра), которая рассуждает, что евреи генетически более умные и, дескать, поэтому-то среди нас них столько ученых (или наоборот).

Нет, Ася, все гораздо проще. Евреи подвергались разной интенсивности гонениям много сотен лет, но никакой великой науки в условных XVII-XVIII веках таки не создали, хотя отбор там уже типа должен был пройти.

Просто-напросто в конце XIX - начале XX века карты сложились идеальным образом. Многовековые традиции логических игр-схоластики в толковании священных текстов, полноценный развитый культ ребе-законоучителей (достаточно послушать хасидские майсы) и дикое желание вырваться из-под дискриминации очень удачно легли на почву общества того времени, которое начало становиться все более светским (Европа, Америка, Россия, но, например, не Ближний Восток и не Индия, хотя евреи были и там).

Выросло то, что выросло: культ уже вполне себе светских, а не религиозных знания и образования - и как самоценных вещей, и как инструментов для того, чтобы занять более достойное место под солнцем. Результат мы знаем: целая плеяда сильнейших ученых, очень круто, если не революционно, продвинувших мир вперед... но сейчас мы уже наблюдаем афтершоки: в таком количестве Эйнштейнов, Паули и прочих Ландау уже нет и, скорее всего, не будет. Наука в современном Израиле - отличный показатель, да: уровень хороший, со своими звездами, но никакая не "фабрика гениев", даже близко.

Ну, а про то, что нобелиаты подозрительно часто вырастают из одних и тех же научных школ (совершенно неважно, кто там стоял у истоков - евреи или гои кто угодно еще), писалось чертовски много раз. В этом смысле Нобелевский комитет тоже любит "тех, кто на виду с юности" (привет, @rlabrats) - научный мир везде в чем-то похож.

В общем и целом, лучше всего про это написал Фейнман:

Один из вопросов, которые мы со студентами-раввинами обсуждали довольно подробно, состоял в том, почему в науке, например, в теоретической физике, процент евреев выше, чем их процент в общем населении. Студенты полагали, что это вызвано тем, что на протяжении всей своей истории евреи уважительно относились к учебе: они уважают своих раввинов, которые, в действительности,обучают их, уважают образование. Евреи непрерывно передают эту традицию из поколения в поколение, так что у них быть прилежным студентом так же хорошо, как быть талантливым футболистом, если не лучше.

В тот же день я еще раз убедился в том, что это действительно так. Один из студентов пригласил меня к себе домой. Он представил меня своей матери, которая только что вернулась из Вашингтона. Она в восторге захлопала в ладоши и сказала: "О! Сегодня я прожила полный день. Я познакомилась с генералом и с профессором!"
Тут я осознал, что совсем немногие считают, что познакомиться с профессором так же важно и так же приятно, как познакомиться с генералом. Так что, вероятно, в том, что они говорили, есть доля истины.

Похожесть ИИ на джинна (исполнительность, беспрекословность, требует точных команд, иначе делает дичь) косвенно подтверждает демоническую природу. Нежить она и есть нежить.

Famous Ariesiac Pervitin