Ой, девоньки - сейчас был на семинаре по сосудистому эндотелию!
Там таааакое, вы только сядьте, хозяюшке на заметку:
1) Значит так, только магнитная сепарация по CD31 - золотой стандарт, FACS как опция.
2) Кальцификация сосудов начинается с образования кальциево-фосфатных белковых частиц с фетуином А. В принципе, они в норме присутствуют - это механизм выведения избыточного кальция. Но если из равновесная концентрация начала смещаться в сторону депонирования - то всё, стоп машина. Печень ещё некоторое время их расчекрыживает, а потом усё - rest in peace.
3) Эндотелий сосудов хер убьёшь обычными методами, он етить какой устойчивый даже к липополисахаридам.
4) Эндотелий, в отличие от фибробластов, достаточно мало секретирует своих молекул.
5) В экспериментах на нём лучше использовать рекомбинантные белки, произведённые в CHO или HEK293. Для THFa разница в активности между колийным и эукариотическим - на порядок, в пользу последнего. Для VEGFA - в 3-4 раза в пользу эукариотических продуцентов.