#сфероиды #microscopy

Сфероид здорового человека и сфероид бульонного, z-контраст. Культура глиобластомы A172.

Попробовал методику просветления при помощи BSA. В целом работает, но есть сложности:

1. Растворять BSA крайне муторно в необходимых концентрациях. Я дошёл до 30%. Авторы в своей статье контролировали RI раствора рефрактометром, но не самое популярное оборудование для биологической лаборатории. У меня нет.

2. Нельзя готовить просто растворяя BSA в DMEM - солевой состав закономерно уползет. По хорошему надо либо компенсировать соли вручную, либо начинать с концентрата среды. Сфероидам было не очень.

3. Как и в статье просветление получилось не идеальное, не через весь сфероид. Картинка, конечно, лучше, чем без процедуры, но все равно не идеал.

4. Не проверял, но даже если напрямую на метаболизм клеток такая вязкая среда не сильно повлияет, на всякие эффекты типа адгезии сфероидов, распластывания и всего такого - обязана.

Надо попробовать просветление Кубелкой-Мунком