Клетки-долгожители помогут увеличить производство лекарственных белков
 
Для промышленного производства терапевтических белков широко используются клетки яичника китайского хомячка (СНО). Однако существуют ограничения времени культивирования, связанные с естественной гибелью клеток.
 
Ранее ученые лаборатории биоинженерии клеток млекопитающих ФИЦ Биотехнологии РАН разработали «долгоживущую» линию клеток и продуценты на ее основе, которые позволяют значительно увеличить выработку фармацевтически значимых белков.
 
В новой научной работе ученые показали, что созданные клетки иначе реагируют на состояние стресса эндоплазматической сети клеток, при котором внутри клетки накапливаются поврежденные белки, что может приводить к прекращению их экспорта наружу и гибели клетки.
 
📝Результаты исследования опубликованы в журнале International Journal of Molecular Sciences.
 
Ученые сравнили два ранее созданных ими промышленных продуцента терапевтических белков на основе клеток яичника китайского хомячка. Один из них, HB8, был получен на основе стандартных клеток CHO-S и производит хорионический гонадотропин человека. Второй, DUL73, создан на основе линии CHO-4BGD, в которой генетически отключен основной путь направленной клеточной смерти (апоптоза) и усилены механизмы выживания клеток. Этот продуцент секретирует аналог дулаглутида – препарата, применяемого в терапии сахарного диабета 2 типа.
 
Для моделирования сильного стресса системы созревания секретируемых белков клетки обрабатывали дитиотреитолом (DTT), нарушающим образование дисульфидных связей, а затем анализировали изменения транскрипции генов.
 
💬 «Клетки яичника китайского хомячка с генетически отключенным внутренним путем апоптоза не просто дольше не погибают, у них по-другому организованы системы поддержания протеостаза (белкового гомеостаза) – правильного сворачивания, созревания и удаления поврежденных белков, а при стрессе они гораздо масштабнее перестраивают метаболизм, оксилительно-восстановительное баланс и внутриклеточный транспорт. Для нас особенно важно, что транскриптомный анализ позволяет увидеть конкретные узкие места и выбрать новые гены-мишени для геномного редактирования. Следующий шаг – создание новых вариантов клеток CHO, еще лучше приспособленных к интенсивному синтезу и секреции терапевтических белков», — комментирует к.б.н. ❤️Надежда Орлова, научный сотрудник лаборатории биоинженерии клеток млекопитающих ФИЦ Биотехнологии РАН.
 
Полученные данные уже позволяют наметить направления дальнейшей геномной инженерии CHO-клеток. Среди потенциальных мишеней – системы доставки синтезируемых белков в эндоплазматический ретикулум, образования дисульфидных связей, контроля качества и удаления неправильно свернутых белков, а также внутриклеточного везикулярного транспорта.
 
Последовательное редактирование этих систем может стать основой для создания нового поколения более устойчивых и продуктивных клеточных фабрик для биофармацевтического производства.

🌐Подробнее читайте в материале Медицинской газеты


Max | Telegram | ВКонтакте | Дзен | Rutube