کتابخانه آمبروسیانا امروز یکی از غنی‌ترین مخازن فرهنگی اروپا محسوب می‌شود و بیش از یک میلیون جلد کتاب چاپی را در خود جای داده است.
افزون بر این، حدود ۳۰ تا ۴۰ هزار نسخه خطی به زبان‌های لاتین، یونانی، عبری، عربی و دیگر زبان‌های شرقی و غربی در این کتابخانه نگهداری می‌شود.
بخش مهمی از این نسخه‌ها شامل متون الهیاتی، فلسفی، تاریخی، ادبی و علمی از سده‌های میانه و رنسانس است.

از برجسته‌ترین گنجینه‌های آمبروسیانا، Codex Atlanticus اثر لئوناردو داوینچی است که مجموعه‌ای عظیم از یادداشت‌ها، طرح‌ها و نقاشی‌های علمی و مهندسی او را در بر می‌گیرد.
در کنار منابع مکتوب، این مجموعه دارای هزاران سند تاریخی، نقشه، طراحی و تصویر ارزشمند است که برای پژوهش‌های تاریخ علم و هنر اهمیت فراوان دارند.

بخش هنری این مجموعه با عنوان پیناکوتکا آمبروسیانا فعالیت می‌کند که در اوایل قرن هفدهم شکل گرفت و شامل آثار شاخصی از هنرمندان بزرگ رنسانس و باروک است.
آثاری از کاراواجو، لئوناردو داوینچی و دیگر استادان ایتالیایی در این گالری نگهداری می‌شود.

کتابخانه آمبروسیانا همچنان به‌عنوان یکی از مراکز مرجع پژوهش‌های تاریخی، هنری و دینی در سطح بین‌المللی شناخته می‌شود و پیوندی کم‌نظیر میان کتابخانه، آرشیو و موزه هنری ایجاد کرده است.

از کانال کتابخانه مرکزی دانشگاه تهران