В заключении своей сессии я прошел короткую летнюю практику по биохимии. На ней нам дали практическое задание - провести ПЦР тест по своей слюне для определения биологического пола
Сам тест состоял из нескольких этапов - сбор самого материала/образца слюны
После чего образец был смешан с раствором СТАВ - это необходимо для разрушения клеточной структуры, чтобы разбить стенки клеток
После чего мы несколько раз проводили экстракцию хлороформом, между этапами помещая раствор в центрифугу
После чего промыли всё этанолом и сделали водный раствор. К сожалению, мой, как показал аппарат содержал достаточно низкую концентрацию ДНК и остаточное загрязнение
После этого раствор был помещен на субрастрат, выдержан в аппарате для ПЦР около двух часов и... Мы переходим к итоговому шагу - электрофорезу. Раствор был смешан с красителем, помещен в гель и выдержан под высокой разностью потенциалов, которая заставляла проникать наш материал в гель. Полноценный образец рассмотрели под ультрафиолетом. Если наблюдалась одна полоса - то пол женский (ХХ набор хромосом), так как размер обеих хромосом одинаков и проникают (диффундируют) в гель они с одинаковой скоростью. Если XY, т.е. пол мужской - то наблюдается две полосы, так как хромосомы разного размера и проникают с разными скоростями
Из-за низкой концентрации растворов, как у меня, так и у нескольких других ребят ничего не было, но сама работа очень интересная
А вы бы хотели пройти практику?
#amphibian | #отчет