👨‍🏫 #آموزش

ساخت کتابخانه در Single cell:
دستگاه 10x Chromium یکی از پیشرفته‌ترین ابزارها برای تولید کتابخانه‌های سینگل سل و بارکد زنی است. مراحل کار با این دستگاه به شرح زیر است:

1. جداسازی سلول‌های تکی: نمونه‌های سلولی به دستگاه وارد می‌شوند و سلول‌های تکی با استفاده از تکنولوژی میکروفلوئیدیک جدا می‌شوند.

2. تشکیل GEMs (Gel Bead-in-Emulsions): سلول‌های تکی با ژل بیدهای حاوی بارکدهای منحصر به فرد ترکیب می‌شوند و در قطرات امولسیون قرار می‌گیرند. هر قطره شامل یک سلول و یک ژل بید است.

3. لیز سلولی و رونویسی معکوس: سلول‌ها در داخل قطرات لیز می‌شوند و RNA آنها آزاد می‌شود. سپس RNA به cDNA تبدیل می‌شود.

4. تقویت (Amplification): cDNA تولید شده با استفاده از PCR تقویت می‌شود تا مقدار کافی برای توالی‌یابی به دست آید.

5. ساخت کتابخانه: cDNA بارکد شده به کتابخانه‌های توالی‌یابی تبدیل می‌شود. این مرحله شامل افزودن آداپتورها و آماده‌سازی نمونه‌ها برای توالی‌یابی است.

6. توالی‌یابی: کتابخانه‌های ساخته شده با استفاده از تکنولوژی‌های نسل جدید توالی‌یابی (مانند Illumina) توالی‌یابی می‌شوند.

🔴🌸 تک‌ سلول👇👇

@singlecel