Как мне пришлось записывать 30 проб + 8 контролей на цитометре за 15 минут.
Я сейчас тестирую разные методы для культивирования мышиных гемопоэтических предшественников ex vivo.
Во вторник у меня был мышиный эксперимент, в котором нужно было насортировать HSPC из мышей с тремя разными генотипами и подготовить пробы для РНК, ДНК и белка. Также я посеяла часть клеток в планшеты и обработала препаратами.
Измерять токсичность я планировала через 72 часа, то есть в пятницу.
Записаться на цитометр получилось только на 9 утра.
Утром я не проверила расписание и подумала, что начало в 9-30.
Ну это еще пол беды.
Изначально я планировала красить антителами, а потом Annexin V в отдельном буфере.
То есть это как минимум 55 минут включая отмывки.
Пока мешала антитела, поняла, что у меня нет подходящего Annexin, так как используемой мной Alexa 647 перекрывается со Sca1-APC.
Вообщем, я решила избавиться от Annexin и красить только антителами.
Пока добежала до цитометра было уже 10-05, промыла к 10-15 и начала экстренно снимать.
Благо у меня был template эксперимента и вольтажи практически не пришлось подкручивать.
В общем, в моей голове проносилось next tube, глаза боялись, а руки делали.
Сейчас смотрю на результаты, вроде бы эксперимент получился неплохим.
Post #1343
2.11K