🔬 اگر دنبال این هستی که بدون طراحی پرایمر، از پرایمرهای موجود و تستشده استفاده کنی، پس ادامه رو ببین! 👇
دریافت توالی پرایمر از Origene و بررسی آن با BLAST
✅ مرحله ۱: ورود به سایت Origene
- به سایت www.origene.com برو
- نام ژن مورد نظرت رو سرچ کن
- وارد صفحه محصول شو (معمولاً qPCR Primer Pairs)
✅مرحله ۲: دریافت توالی پرایمرها
- در بخش محصول، توالیهای Forward و
Reverse primer رو پیدا کن
- آنها رو کپی کن (معمولاً به صورت 5' به 3' نوشته شدن)
✅ مرحله ۳: بررسی با NCBI BLAST
- به سایت blast.ncbi.nlm.nih.gov برو
- گزینه Nucleotide BLAST رو انتخاب کن
- توالی پرایمر Forward رو Paste کن
- Database رو روی RefSeq mRNA یا Genomic + transcript بذار
- دکمه BLAST رو بزن
✅ مرحله : تحلیل نتایج
- بررسی کن که پرایمر فقط به ژن مورد نظر تو متصل بشه (Specificity)
💡 نکته مهم:
پرایمرهای Origene معمولاً validate شدن، اما بهتره قبل از استفاده، حتماً با BLAST بررسی بشن تا از اختصاصیت اونها مطمئن بشی!
Post #232
191
