#دانستنی
🧪اگزوزوم:
اگزوزومها (Exosomes) کیسههای کوچک و غشاداری هستند که توسط سلولها به محیط بیرون ترشح میشوند. این ساختارهای نانومتری (معمولاً بین ۳۰ تا ۱۵۰ نانومتر) نقش مهمی در ارتباطات بین سلولی و انتقال مولکولهای زیستی مانند پروتئینها، لیپیدها، RNAها (از جمله mRNA و miRNA) و DNA ایفا میکنند. اگزوزومها در مایعات بدن مانند خون، ادرار، مایع مغزی-نخاعی و حتی شیر یافت میشوند.
استخراج اگزوزومها و استفاده از آنها در تحقیقات علمی شامل مراحل مختلفی است که از جداسازی و خالصسازی اگزوزومها تا آنالیز و کاربردهای عملی را در بر میگیرد.
۱. استخراج اگزوزومها
استخراج اگزوزومها از مایعات بدن مانند خون، ادرار، مایع مغزی-نخاعی و حتی محیط کشت سلولی انجام میشود. روشهای مختلفی برای این کار وجود دارد که برخی از رایجترین آنها عبارتند از:
الف) اولتراسانتریفیوژ (Ultracentrifugation)
- مراحل:
۱. نمونه مایع (مانند خون یا ادرار) جمعآوری میشود.
۲. نمونه با سرعت کم سانتریفیوژ میشود تا سلولها و بقایای بزرگ حذف شوند.
۳. سوپرناتانت با سرعت بالا سانتریفیوژ میشود (معمولاً ۱۰۰,۰۰۰ تا ۱۲۰,۰۰۰ گرم) تا اگزوزومها رسوب کنند.
۴. رسوب اگزوزومها جمعآوری و در بافر مناسب بازسازی میشود.
- مزایا: روش استاندارد و قابل اعتماد.
- معایب: زمانبر و نیاز به تجهیزات تخصصی.
ب) کیتهای تجاری
- مراحل:
۱. نمونه مایع با معرفهای شیمیایی خاص مخلوط میشود.
۲. اگزوزومها به صورت انتخابی رسوب یا جذب میشوند.
۳. اگزوزومها جمعآوری و خالصسازی میشوند.
- مزایا: سریع و آسان، نیاز به تجهیزات تخصصی کم.
- معایب: هزینه بالا و گاهی خالصسازی ناکافی.
ج) کروماتوگرافی
- مراحل:
۱. نمونه از طریق ستونهای کروماتوگرافی عبور داده میشود.
۲. اگزوزومها بر اساس اندازه، بار یا اتصال به لیگاندهای خاص جدا میشوند.
- مزایا: خالصسازی با خلوص بالا.
- معایب: نیاز به تجهیزات تخصصی و زمانبر.
د) فیلتراسیون
- مراحل:
۱. نمونه از طریق فیلترهای با اندازه منافذ خاص عبور داده میشود.
۲. اگزوزومها بر اساس اندازه جدا میشوند.
- مزایا: ساده و سریع.
- معایب: ممکن است خلوص کافی نداشته باشد.
📍با تشکر از خانم نرگس حسینی زاده از دانشگاه کوثر بجنورد بابت ارسال
@bazaarlabshop
@bazaarlab
Post #114
105