#زیست_شناسی_سلولی_مولکولی

🧬 | تکنیک‌های DNA و RNA

8⃣ کلونینگ ژنی: ساختن کپی‌های فراوان از ژن‌ها

کلونینگ ژنی فرآیندی چند مرحله‌ای است که هدف آن تولید تعداد زیادی کپی از یک قطعه DNA خاص (معمولاً یک ژن) است. این کار معمولاً با برش دادن قطعه DNA مورد نظر با آنزیم‌های محدودکننده (Restriction Enzymes) و سپس الحاق آن به یک ناقل کلونینگ (Cloning Vector)، مانند پلاسمیدهای باکتریایی، صورت می‌گیرد. اتصال توسط آنزیم لیگاز (Ligase) انجام می‌شود. سپس این پلاسمید نوترکیب به سلول‌های میزبان (اغلب باکتری E. coli) وارد شده (Transfection/Transformation). با رشد باکتری‌ها، پلاسمید نیز همانندسازی شده و تعداد زیادی کپی از ژن مورد نظر تولید می‌شود. سپس پلاسمیدها از باکتری‌ها استخراج و خالص‌سازی می‌شوند. کلونینگ ژنی برای تولید پروتئین‌های نوترکیب (مانند انسولین)، ساخت وکتورهای ژن‌درمانی، و مطالعات عملکردی ژن‌ها ضروری است.

🌐 @Cellsiatence