#زیست_شناسی_سلولی_مولکولی

🧬 | تکنیک‌های DNA و RNA

4⃣ تکنیک qPCR یا Real-time PCR: سنجش کمی بیان ژن

تکنیک qPCR (Quantitative PCR) که به عنوان Real-time PCR نیز شناخته می‌شود، نسخه پیشرفته و کمی PCR است. برخلاف PCR معمولی که تنها حضور یا عدم حضور محصول را در انتهای واکنش نشان می‌دهد، qPCR در هر چرخه، میزان محصول PCR را به صورت زنده و بلادرنگ (real-time) با استفاده از فلورسانس اندازه‌گیری می‌کند. این فلورسانس می‌تواند از طریق یک رنگ فلورسنت که به DNA دو رشته‌ای متصل می‌شود (مانند SYBR Green) یا از طریق پروب‌های فلورسنت اختصاصی (مانند TaqMan probes) تولید شود. با رسم میزان فلورسانس بر حسب تعداد چرخه‌ها، می‌توان “چرخه آستانه” (Ct value) را تعیین کرد که نشان‌دهنده میزان اولیه DNA الگو است. Ct کمتر به معنی مقدار اولیه بیشتر DNA است. qPCR ابزاری قدرتمند برای اندازه‌گیری دقیق میزان بیان ژن‌ها، تشخیص کمی عوامل بیماری‌زا، و اعتبارسنجی نتایج آزمایش‌های دیگر است.

🌐 @Cellsitence