#زیست_شناسی_سلولی_مولکولی

🧬 | تکنیک‌های DNA و RNA

3⃣ تکنیک PCR (واکنش زنجیره‌ای پلیمراز): تکثیر هدفمند DNA

این تکنیک یکی از پرکاربردترین و مهم‌ترین تکنیک‌ها در زیست‌شناسی مولکولی است که امکان تکثیر هدفمند و نمایی (exponential) یک قطعه خاص از DNA را فراهم می‌آورد. این فرایند در چرخه‌های حرارتی تکرارشونده انجام می‌شود:

دناتوراسیون : در دمای بالا (حدود ۹۵ درجه سانتی‌گراد)، رشته‌های دوگانه DNA از هم باز می‌شوند.

اتصال پرایمر: دما کاهش یافته (حدود ۵۰-۶۵ درجه سانتی‌گراد) تا پرایمرهای کوتاه (که توالی آن‌ها مشخص و مکمل نواحی ابتدایی و انتهایی قطعه هدف هستند) به رشته‌های DNA تک‌رشته‌ای متصل شوند.

امتداد: دما به حدود ۷۲ درجه سانتی‌گراد افزایش یافته تا آنزیم پلیمراز (مانند Taq polymerase) نوکلئوتیدها را بر اساس الگوی DNA، از انتهای پرایمر به سمت جلو حرکت داده و رشته مکمل جدید را بسازد.

هر چرخه، تعداد قطعات DNA هدف را دو برابر می‌کند. پس از ۲۰ تا ۳۰ چرخه، میلیون‌ها کپی از قطعه DNA مورد نظر تولید می‌شود. PCR پایه و اساس بسیاری از تکنیک‌های دیگر، از جمله تعیین توالی، ژنوتایپینگ، و کلونینگ است.

🌐 @Cellsitence